- Caractérisation par spectrométrie de masse des complexes circulants dans la néphropathie à dépôts d’immunoglobuline A de l’adulte.
CHEMOUNY J.M. (1,2), DAUGAS E. (1,2), VRTOVSNIK F. (1,2), RAVERY V. (3), CHOUDAT L. (4), WALKER F. (4), MONTEIRO R. (1,5), BERTHELOT L. (1)
- INSERM U1149, Université Paris-Diderot et Inflamex, Paris, France.
- Service de Néphrologie, Hôpital Bichat, Paris, France
- Service d’Urologie, Hôpital Bichat, Paris, France
- Département de Pathologie, Hôpital Bichat, Paris, France
- Laboratoire d’Immunologie, Hôpital Bichat, Paris, France
jonathan.chemouny@inserm.fr
Introduction : Un tiers des patients atteints de néphropathie à immunoglobulines A (N-IgA) relèvent de la dialyse dans les 20 ans suivant le diagnostic. Des complexes protéiques de haut poids moléculaires, contenant des IgA anormalement glycosylées et le récepteur des IgA (CD89) sont reconnus comme des acteurs essentiels de la physiopathologie, mais leur composition n’est qu’en partie connue. Nous utilisons la spectrométrie de masse pour identifier ces protéines présentes dans les complexes circulants et glomérulaires.
Méthodes : Un volume de sérum provenant de 10 patients suivis dans le service de néphrologie de l’hôpital Bichat et de 10 contrôles sains correspondant à 10µg d’IgA totale a été déposé pour migration dans un gel de polyacrylamide en condition non dénaturante. Les bandes d’intérêt ont été identifiées par Western-Blot anti-IgA et anti-CD89 puis découpées pour identification et quantification relative des protéines présentes.
Résultats : Une bande contenant à la fois IgA et CD89 a été identifiée (Figure). L’analyse par spectrométrie de masse a identifié 479 protéines dont la quantité de 28 était significativement augmentée et 25 diminuées chez les patients par rapport aux contrôles.
Conclusion : Nous avons identifié 28 protéines migrant avec les complexes macromoléculaires d’IgA augmentées chez les patients atteints de N-IgA. Les protéines, également augmentées dans les glomérules des patients, seront étudiées par méthode biochimique dans une cohorte plus importante de patients afin de confirmer leur implication dans la maladie et mises en relation avec les données cliniques pour évaluer leur potentielle implication dans son évolution.